757-300为-200的加长型，虽提升了载客量但却换来航程的减少。1996年9月2日正式启动研制，首架原型机于1998年8月2日首次飞行，1999年1月27日获得FAA型号合格证，同时获得了180minETOPS适航批准，同年3月10日首次交付用户。
757-300的载客量为252人，飞行距离为3,500海里。此型号飞机共有8扇标准舱门，另外4扇置于机翼位置（每边两扇）。757-300还拥有与“新一代”737 （NG）相似的客舱，与波音777客舱协调。